Matteucinol combined with temozolomide inhibits glioblastoma proliferation, invasion, and progression: an in vitro, in silico, and in vivo study

Glioblastoma is the most prevalent and malignant brain tumor identified in adults. Surgical resection followed by radiotherapy and chemotherapy, mainly with temozolomide (TMZ), is the chosen treatment for this type of tumor. However, the average survival of patients is around 15 months. Novel approaches to glioblastoma treatment are greatly needed. Here, we aimed to investigate the anti-glioblastoma effect of the combination of matteucinol (Mat) (dihydroxyflavanone derived from Miconia chamissois Naudin) with the chemotherapeutic TMZ in vitro using tumor (U-251MG) and normal astrocyte (NHA) cell lines and in vivo using the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay. The combination was cytotoxic and selective for tumor cells (28 μg/mL Mat and 9.71 μg/mL TMZ). Additionally, the combination did not alter cell adhesion but caused morphological changes characteristic of apoptosis in vitro. Notably, the combination was also able to reduce tumor growth in the chick embryo model (CAM assay). The docking results showed that Mat was the best ligand to the cell death membrane receptor TNFR1 and to TNFR1/TMZ complex, suggesting that these two molecules may be working together increasing their potential. In conclusion, Mat-TMZ can be a good candidate for pharmacokinetic studies in view of clinical use for the treatment of glioblastoma.

Análise termográfica aplicada na produção de calor corporal de vacas F1 HxZ manejadas em diferentes microclimas / Thermographic analysis applied to body heat production of F1 HxZ cows managed in different microclimates

Avaliou-se a produção de calor corporal de vacas F1 HxZ manejadas em diferentes microclimas. Foram avaliadas 48 vacas, divididas em três grupos, manejadas em pastos e microclimas diferentes. Cada grupo foi subdividido em três grupos de suplementação fornecida durante a ordenha. Os registros termográficos dos flancos direito e esquerdo ocorreram com os animais a pasto. As temperaturas do olho e retal foram mensuradas após a ordenha. O ITGU caracterizou sinal de perigo para o microclima 1 no período da tarde (81,7) e para o microclima 2 nos turnos da manhã e da tarde (81,6 e 83,8, respectivamente). No microclima 2, houve diferença da temperatura do flanco direito para animais do grupo 2 em relação aos animais do grupo 3. A temperatura do flanco esquerdo foi superior para os animais do grupo 1. O microclima 1 foi caracterizado de conforto térmico, e o 2 de desconforto nos períodos da manhã e da tarde. A suplementação não influenciou na produção de calor dos animais. As médias da temperatura retal e do olho não diferiram entre os grupos, e a correlação apresentou valores baixos e moderados para os microclimas 1 e 2, respectivamente. A oferta de diferentes fontes de suplementação não interfere na produção de calor corporal de vacas F1 HxZ, mesmo quando fornecido em ambiente climático em que o ITGU é próximo a 84.(AU)

Body heat production of F1 HxZ cows managed in different microclimates was evaluated. We evaluated 48 cows, divided into two groups, managed in different pastures and microclimates. Each group was subdivided into three groups of supplementation provided during milking. The thermographic records of the right and left flanks occurred with the animals on the grass. Eye and rectal temperatures were measured after milking. The BGT had a danger signal for microclimate 1 in the afternoon (81.7) and microclimate 2 in the morning and afternoon shifts (81.6 and 83.8, respectively). In microclimate 2, there was difference in the temperature of the right flank for animals in group 2 in relation to the animals in group 3. The temperature of the left flank was higher for the animals in the group 1. Microclimate 1 was characterized by thermal comfort and 2 was discomfort in the morning and afternoon. Supplementation did not influence the heat production of the animals. Rectal and eye mean averages did not differ between groups and the correlation presented low and moderate values for microclimate 1 and 2, respectively. The supply of different sources of supplementation does not interfere with the production and body heat of F1 HxZ cows even when supplied in a climatic environment in which the BGT is close to 84.(AU)

Composição nutricional e valores energéticos determinados com frangos de corte de coprodutos do processamento do etanol de milho / Nutritional composition and energy values determined with broilers of co-products from the processing of corn ethanol

It was determined by the total collection of excreta method, with broilers from 22 to 32 days of age, the coefficients of apparent metabolism of dry matter, crude protein and crude energy and apparent metabolizable energy corrected for zero nitrogen balance (AMEn) of the ethanol co-products of corn: acid oil and dried distillery grains with soluble (DDGS). The DDGS and corn acid oil presented nutritional metabolization coefficients ranging from 43 to 83% and AMEn equal 2393.5 and 7859.2kcal/kg respectively, and may be food alternatives to soybean meal and soybean oil.(AU)

Yeasts and filamentous fungi in psittacidae and birds of prey droppings in midwest region of Brazil: a potential hazard to human health / Leveduras e fungos filamentosos em excretas de psittacideos e aves de rapina em cativeiro na região centro-oeste do Brasil: um risco potencial para a saúde humana

Abstract Birds of prey and from Psittacidae family are host to fungal microbiota and play an important role in the epidemiology of zoonoses. Few studies in the literature have characterized mycelial and yeast fungi in the droppings of these birds and correlated the isolates with the zoonotic potential of the microorganisms. Droppings from 149 birds were evaluated and divided into two groups: captive: Rhea americana araneipes, Primolius maracana, Ara ararauna, Ara chloropterus, Anodorhynchus hyacinthinus, Amazona aestiva, Ara macao macao, Ramphastos toco, Sarcoramphus papa, Busarellus nigricollis, Bubo virginianus nacurutu, Buteogallus coronatus, Buteogallus urubitinga urubitinga, Spizaetus melanoleucus, Spizaetus ornatus ornatus, Buteo albonotatus, Geranoaetus albicaudatus albicaudatus, Rupornis magnirostris magnirostris and Harpia harpyja, and quarantined birds: Amazona aestiva and Eupsitulla aurea. The fungal isolates were identified according to macroscopic (gross colony appearance), micromorphological and biochemical characteristics. Among birds displayed in enclosures, Aspergillus niger (41.1%) and Candida kefyr (63.8%) were the fungi most frequently isolated in Harpia harpyja and Ramphastos toco, respectively. For quarantined birds, the following percentages were observed in Eupsittula aurea , (76.6%) C. krusei, (84.4%) C. kefyr and (15.2%) C. famata, while in Amazona aestiva, (76.2%) C. krusei was observed. These findings indicate potentially pathogenic species in the bird droppings assessed, which constitute a risk of exposure for keepers and individuals who visit the zoo. Birds of the Cerrado and Pantanal of Mato Grosso (Central Western region of Brazil) could act in the epidemiological chain of important zoonoses.

Resumo Aves de rapina e psitacídeos são hospedeiras de uma rica microbiota fúngica e desempenham um papel importante na epidemiologia de zoonoses. Poucos estudos na literatura têm caracterizado fungos micelianos e leveduras nos excrementos de pássaros e correlacionados estes isolados com o potencial zoonótico dos microrganismos isolados. Excrementos de 149 aves foram divididas e avaliados em dois grupos: Em cativeiro: Rhea americana araneipes, Primolius maracana, Ara ararauna, Ara chloropterus, Anodorhynchus hyacinthinus, Amazona aestiva, Ara macao macao, Ramphastos toco, Sarcoramphus papa, Busarellus nigricollis , Bubo virginianus nacurutu, Buteogallus coronatus, Buteogallus urubutinga urubitinga, Spizaetus melanoleucus, Spizaetus ornatus ornatus, Buteo albonotatus, Geranoaetus albicaudatus albicaudatus, Rupornis magnirostris magnirostris e Harpia harpyja e aves em quarentena: Amazona aestiva e Eupsittula aurea). Os isolados de leveduras e de fungos micelianos foram identificados em observações macroscópicas (aspectos das colônias), características micromorfológicas e bioquímicas. Entre as aves indicadas em compartimentos, Aspergillus niger (41,1%) e Candida kefyr (63,8%) foram os fungos mais isolada em Harpia harpyja e Ramphastos toco, respectivamente. Para as aves em quarentena, os seguintes percentuais foram observados em Eupsittula aurea (76,6%) C. krusei, (84,4%) C. kefyr e (15,2%) C. famata, enquanto em Amazona aestiva (76,2%) de C. krusei foi observada. Estes resultados indicam a presença de espécies potencialmente patogênicos nas excretas das aves avaliadas, constituem um risco a exposição para os criadores e pessoas que visitam o zoológico. Aves do Pantanal e do Cerrado de Mato Grosso (região Centro-Oeste do Brasil) poderia atuar na cadeia epidemiológica das zoonoses importantes.

Nitric oxide and immune response in infection control of Caseous Lymphadenitis / Óxido nítrico e resposta imune no controle de infecção da Linfadenite Caseosa

This study aimed to evaluate aspects of host immune response using an experimental infection model of Corynebacterium pseudotuberculosis (CP) in C57/Black6 wild-type and knockout for nitric oxide (KO-NO) mice. 28 mice were evaluated: 4 wild-type controls; 10 wild-type infected with CP; 4 KO-NO controls; 10 KO-NO infected with CP. Infection procedures were carried out by intraperitoneal inoculation using 107. Infected C57/Black6 KO-NO mice began to die after the 5° day post-inoculation, up until the 14º day. Neutrophils were found in increased numbers in the infiltrate of KO-NO murine peritoneal cavities. Examination of splenic tissue revealed an accumulation of lymphocytes, predominantly CD8 T-cells, in experimental animal groups. KO-NO animals were found to have a predominance of granulomas 7 days post-inoculation, primarily in the lymph nodes. In addition, greater amounts of bacteria were recovered from the mesenteric lymph nodes of KO-NO mice. There was no statistically significant difference in the levels of total IgG and its subclasses 14 days post-inoculation between KO-NO and wild groups. The results suggest the importance of nitric oxide in the process of controlling CP infection, as KO-NO animals were observed to be markedly more affected by infection with this bacterium.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos da resposta imune do hospedeiro, mediante o uso de um modelo experimental de infecção de Corynebacterium pseudotuberculosis (CP) em camundongos C57/Black6 do tipo selvagem e em C57/Black6 knockout para o óxido nítrico (KO-NO). Foram avaliados 28 camundongos: quatro controles de tipo selvagem; 10 do tipo selvagem infectados com CP; quatro controles KO-NO; e 10 KO-NO infectados com CP. A infecção foi realizada via intraperitoneal, usando-se 107. Os animais C57/Black6 KO-NO infectados começaram a vir a óbito no quinto dia pós-inoculação, o que aconteceu até o 14º dia. Um número maior de neutrófilos foi encontrado na sua cavidade peritoneal. O exame do baço revelou um acúmulo de linfócitos, predominantemente células T CD8, nos grupos de animais experimentais. Nos animais KO-NO, foi observada a presença de granulomas, sete dias pós-inoculação, principalmente nos gânglios linfáticos. Além disso, uma maior quantidade de bactérias foi detectada dos linfonodos mesentéricos desses animais. Não houve diferença estatisticamente significante nos níveis séricos IgG total e em suas subclasses aos 14 dias pós-inoculação nos grupos KO-NO e selvagem. Os resultados obtidos sugerem a importância do óxido nítrico no processo de controle da infecção por CP.(AU)

Risk factors for gastrointestinal parasite infections of dogs living around protected areas of the Atlantic Forest: implications for human and wildlife health / Fatores de risco para infecções parasitárias gastrointestinais em cães do entorno de áreas protegidas da Mata Atlântica: implicações para a saúde humana e da vida selvagem

Abstract Despite the ubiquity of domestic dogs, their role as zoonotic reservoirs and the large number of studies concerning parasites in urban dogs, rural areas in Brazil, especially those at the wildlife-domestic animal-human interface, have received little attention from scientists and public health managers. This paper reports a cross-sectional epidemiological survey of gastrointestinal parasites of rural dogs living in farms around Atlantic Forest fragments. Through standard parasitological methods (flotation and sedimentation), 13 parasite taxa (11 helminths and two protozoans) were found in feces samples from dogs. The most prevalent were the nematode Ancylostoma (47%) followed by Toxocara (18%) and Trichuris (8%). Other less prevalent (<2%) parasites found were Capillaria, Ascaridia, Spirocerca, Taeniidae, Acantocephala, Ascaris, Dipylidium caninum, Toxascaris, and the protozoans Cystoisospora and Eimeria. Mixed infections were found in 36% of samples, mostly by Ancylostoma and Toxocara. Previous deworming had no association with infections, meaning that this preventive measure is being incorrectly performed by owners. Regarding risk factors, dogs younger than one year were more likely to be infected with Toxocara, and purebred dogs with Trichuris. The number of cats in the households was positively associated with Trichuris infection, while male dogs and low body scores were associated with mixed infections. The lack of associations with dog free-ranging behavior and access to forest or villages indicates that infections are mostly acquired around the households. The results highlight the risk of zoonotic and wildlife parasite infections from dogs and the need for monitoring and controlling parasites of domestic animals in human-wildlife interface areas.

Resumo Apesar da ubiquidade dos cães domésticos, de seu papel como reservatório de doenças, e do grande número de estudos sobre parasitas de cães urbanos, as áreas rurais no Brasil, especialmente aquelas na interface entre animais silvestres - animais domésticos - humanos, tem recebido pouca atenção de cientistas e gestores de saúde pública. Este artigo relata um estudo epidemiológico seccional de parasitas gastrointestinais de cães rurais em propriedades no entorno de fragmentos de Mata Atlântica. Através de métodos parasitológicos como flutuação e sedimentação, 13 táxons de parasitas (11 helmintos e dois protozoários) foram encontrados em amostras de fezes dos cães. O mais prevalente foi o nematóide Ancylostoma (47%), seguido por Toxocara (18%) e Trichuris (8%). Outros parasitas menos prevalentes (<2%) encontrados foram Capillaria, Ascaridia, Spirocerca, Taeniidae, Acantocephala, Ascaris, Dipylidium caninum, Toxascaris, e os protozoários Cystoisospora and Eimeria. Infecções mistas foram detectadas em 36% das amostras, a maioria por Ancylostoma e Toxocara. Vermifugações prévias não foram associadas a infecções, indicando que esta medida preventiva está sendo realizada incorretamente pelos proprietários. Com relação aos fatores de risco, cães com menos de um ano tiveram maior probabilidade de infecção por Toxocara, e os cães de raça pura por Trichuris. O número de gatos na propriedade foi associado positivamente com a infecção por Trichuris, enquanto cães machos e baixos escores corporais foram associados a infecções mistas. A ausência de associações com comportamento de vida livre e acesso a florestas ou vilas pelos cães indica que as infecções estão sendo predominantemente adquiridas nas propriedades. Os resultados destacam o risco de infecções parasitárias zoonóticas e para animais silvestres a partir dos cães, e a necessidade de monitorar e controlar os parasitas de animais domésticos em áreas de interface entre humanos e a vida selvagem.

Yeasts and filamentous fungi in psittacidae and birds of prey droppings in midwest region of Brazil: a potential hazard to human health

Abstract Birds of prey and from Psittacidae family are host to fungal microbiota and play an important role in the epidemiology of zoonoses. Few studies in the literature have characterized mycelial and yeast fungi in the droppings of these birds and correlated the isolates with the zoonotic potential of the microorganisms. Droppings from 149 birds were evaluated and divided into two groups: captive: Rhea americana araneipes, Primolius maracana, Ara ararauna, Ara chloropterus, Anodorhynchus hyacinthinus, Amazona aestiva, Ara macao macao, Ramphastos toco, Sarcoramphus papa, Busarellus nigricollis, Bubo virginianus nacurutu, Buteogallus coronatus, Buteogallus urubitinga urubitinga, Spizaetus melanoleucus, Spizaetus ornatus ornatus, Buteo albonotatus, Geranoaetus albicaudatus albicaudatus, Rupornis magnirostris magnirostris and Harpia harpyja, and quarantined birds: Amazona aestiva and Eupsitulla aurea. The fungal isolates were identified according to macroscopic (gross colony appearance), micromorphological and biochemical characteristics. Among birds displayed in enclosures, Aspergillus niger (41.1%) and Candida kefyr (63.8%) were the fungi most frequently isolated in Harpia harpyja and Ramphastos toco, respectively. For quarantined birds, the following percentages were observed in Eupsittula aurea , (76.6%) C. krusei, (84.4%) C. kefyr and (15.2%) C. famata, while in Amazona aestiva, (76.2%) C. krusei was observed. These findings indicate potentially pathogenic species in the bird droppings assessed, which constitute a risk of exposure for keepers and individuals who visit the zoo. Birds of the Cerrado and Pantanal of Mato Grosso (Central Western region of Brazil) could act in the epidemiological chain of important zoonoses.

Resumo Aves de rapina e psitacídeos são hospedeiras de uma rica microbiota fúngica e desempenham um papel importante na epidemiologia de zoonoses. Poucos estudos na literatura têm caracterizado fungos micelianos e leveduras nos excrementos de pássaros e correlacionados estes isolados com o potencial zoonótico dos microrganismos isolados. Excrementos de 149 aves foram divididas e avaliados em dois grupos: Em cativeiro: Rhea americana araneipes, Primolius maracana, Ara ararauna, Ara chloropterus, Anodorhynchus hyacinthinus, Amazona aestiva, Ara macao macao, Ramphastos toco, Sarcoramphus papa, Busarellus nigricollis , Bubo virginianus nacurutu, Buteogallus coronatus, Buteogallus urubutinga urubitinga, Spizaetus melanoleucus, Spizaetus ornatus ornatus, Buteo albonotatus, Geranoaetus albicaudatus albicaudatus, Rupornis magnirostris magnirostris e Harpia harpyja e aves em quarentena: Amazona aestiva e Eupsittula aurea). Os isolados de leveduras e de fungos micelianos foram identificados em observações macroscópicas (aspectos das colônias), características micromorfológicas e bioquímicas. Entre as aves indicadas em compartimentos, Aspergillus niger (41,1%) e Candida kefyr (63,8%) foram os fungos mais isolada em Harpia harpyja e Ramphastos toco, respectivamente. Para as aves em quarentena, os seguintes percentuais foram observados em Eupsittula aurea (76,6%) C. krusei, (84,4%) C. kefyr e (15,2%) C. famata, enquanto em Amazona aestiva (76,2%) de C. krusei foi observada. Estes resultados indicam a presença de espécies potencialmente patogênicos nas excretas das aves avaliadas, constituem um risco a exposição para os criadores e pessoas que visitam o zoológico. Aves do Pantanal e do Cerrado de Mato Grosso (região Centro-Oeste do Brasil) poderia atuar na cadeia epidemiológica das zoonoses importantes.

Molecular investigation of Neorickettsia risticii in trematodes and snails in a region with serological evidence of this agent in horses, state of Rio de Janeiro / Pesquisa molecular de Neorickettsia risticii em trematódeos e moluscos em região com evidência sorológica do agente em equinos, estado do Rio de Janeiro

In Brazil, some studies have indicated that Neorickettsia risticii circulates in horses, but it is unclear which are the possible intermediate vectors of this bacterium in the country. The aim of this study was to use molecular techniques in order to analyze the presence of N. risticii in snails and larval stages of trematodes in farms in a region with a history of seroreactive horses towards this bacterium, in Rio de Janeiro, Brazil. Convenience sampling was used in the studied region. The collected snails were exposed to incandescent light (60W) for 2-4 hours in order to investigate trematodes in larval forms. Deoxyribonucleic acid (DNA) was extracted from snail tissue and trematode. Real-time PCR (qPCR) technique was used to investigate the presence of a 16S rRNA gene fragment of N. risticii. Snail specimens (n=410) were collected from 11 horse-breeding farms, and the following species were identified: Melanoides tuberculata, Pomacea sp., Biomphalaria tenagophila, Physa acuta, Drepanotrema anatinum and Biomphalaria straminea. Only 3.17% (n=13/410) of the collected snails were infected by trematodes. The cercariae obtained from these snails were classified as Megalourous cercariae, Pleurolophocercus cercariae and Furcocercous cercariae. There was no amplification of the target DNA of N. risticii in the snail and trematode samples tested by qPCR. Based on these data, the transmission of N. risticii by trematodes using these snail species in this region does not appear to occur or occurs at very low rates. Thus, further studies are needed in order to clarify which species of invertebrate hosts are infected by this bacterium and potentially participate in the transmission chain of equine neorickettsiosis in the state of Rio de Janeiro, Brazil.(AU)

No Brasil, estudos apontam a circulação de Neorickettsia risticii em equinos, contudo não estão claros quais os possíveis vetores intermediários dessa bactéria no país. O objetivo do presente estudo foi analisar a presença de N. risticii, utilizando-se técnicas moleculares, em caramujos e estágios larvais de trematódeos em propriedades rurais de uma região com histórico de equinos sororreativos para essa bactéria, no Rio de Janeiro, Brasil. Uma amostragem por conveniência foi utilizada na região de estudo. Os caramujos coletados foram expostos à luz incandescente (60W) durante duas-quatro horas para a investigação de trematódeos nas formas larvais. A extração de ácido desoxirribonucleico (DNA) foi realizada em tecidos de caramujos e trematódeos. A técnica de PCR em tempo real (qPCR) foi utilizada para investigar a presença de um fragmento do gene 16S rRNA de N. risticii. Foram coletados 410 espécimes de caramujos de 11 propriedades com criações de equinos, sendo identificadas as seguintes espécies: Melanoides tuberculata, Pomacea sp., Biomphalaria tenagophila, Physa acuta, Drepanotrema anatinum e Biomphalaria straminea. Apenas 3,17% (n=13/410) dos caramujos identificados estavam infectados por trematódeos. As cercárias obtidas desses caramujos foram classificadas em Megalourous cercariae, Pleurolophocercus cercariae e Furcocercous cercariae. Não foi observada a amplificação do DNA-alvo de N. risticii, por meio da qPCR, em nenhuma das amostras de caramujos e trematódeos testadas. Com base nesses dados, a transmissão de N. risticii por trematódeos que utilizam as espécies de caramujos nessa região parece não ocorrer ou ocorre a taxas muito reduzidas. Portanto, novos estudos são necessários para elucidar quais espécies de hospedeiros invertebrados se infectam por essa bactéria e potencialmente participam da cadeia de transmissão da neorickettsiose equina no estado do Rio de Janeiro, Brasil.(AU)

Efficient assembly of full-length infectious clone of Brazilian IBDV isolate by homologous recombination in yeast

The Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) causes immunosuppression in young chickens. Advances in molecular virology and vaccines for IBDV have been achieved by viral reverse genetics (VRG). VRG for IBDV has undergone changes over time, however all strategies used to generate particles of IBDV involves multiple rounds of amplification and need of in vitro ligation and restriction sites. The aim of this research was to build the world's first VRG for IBDV by yeast-based homologous recombination; a more efficient, robust and simple process than cloning by in vitro ligation. The wild type IBDV (Wt-IBDV-Br) was isolated in Brazil and had its genome cloned in pJG-CMV-HDR vector by yeast-based homologous recombination. The clones were transfected into chicken embryo fibroblasts and the recovered virus (IC-IBDV-Br) showed genetic stability and similar phenotype to Wt-IBDV-Br, which were observed by nucleotide sequence, focus size/morphology and replication kinetics, respectively. Thus, IBDV reverse genetics by yeast-based homologous recombination provides tools to IBDV understanding and vaccines/viral vectors development.

ELISA and modified toxin-binding inhibition test for quality control of the clostridial vaccine processes / ELISA direto e ToBI-test modificado para o controle de qualidade de processos de vacinas clostridiais

This study aimed to assess and standardize the ELISA and modified ToBI test in vitro methods in order to verify the potency of epsilon toxicoid in comparison with the in vivo TCP method. The following epsilon toxoids were used: NIBSC standard from batches 375/07, 532/08, 551/08, 373/07 and 378/07. These were evaluated using a TCP test, ELISA and ToBI tests. The results indicate that the correlation ratio between the dilutions of standard NIBSC toxicoid and absorbance values of 89.44% obtained with the ELISA method support the use of the curve to evaluate epsilon toxoids. However, it was observed that the absorbance values were similar for all toxoids, thus presenting no significant difference between higher and lower concentration toxoids. For the ToBI test, the correlation ratio of 96.76, obtained in the curve pattern, demonstrates the effectiveness of the curve to be used in the epsilon toxoid evaluation. The correlation ratio between the titration degrees of toxoids obtained through TCP and ToBI tests was higher than 90%. It is concluded that the type of ELISA test used does present discriminative power for toxoids with different concentrations, which does not support the use of this technique for such a purpose. The ToBI test can be used as a screening method for it is sensitive and effective to detect epsilon toxicoid produced by C. perfringens type D...

Teve-se por objetivo avaliar e padronizar as metodologias in vitro, ELISA e ToBI-test modificado, para a análise de toxoide épsilon, em comparação com a metodologia in vivo TCP. Foram utilizados os seguintes toxoides épsilon: padrão NIBSC e os lotes 375/07, 532/08, 551/08, 373/07 e 378/07, os quais foram avaliados por métodos in vivo, TCP, e in vitro, ELISA e ToBI-test. A análise do título de toxoide épsilon por meio dos métodos in vitro foi realizada a partir de uma curva-padrão, estabelecida previamente. Os principais resultados mostram que os valores de absorbância foram semelhantes para todos os toxoides, não apresentando diferença significativa entre os toxoides mais concentrados e menos concentrados. No ToBI-test, o coeficiente de correlação de 96,76%, obtido na curva-padrão, demonstra a eficiência da curva para avaliação do toxoide épsilon. O coeficiente de correlação entre os títulos de toxoide obtidos pelo TCP e ToBI-test foi superior a 90%. Conclui-se que o tipo de ELISA utilizado não apresenta poder discriminativo para toxoides com diferentes concentrações, inviabilizando a técnica para esse fim. O ToBI-test pode ser utilizado como um método de triagem sensível e eficaz para a detecção de toxoide épsilon de C. perfringens tipo D...

Tank bromeliad water: similar or distinct environments for research of bacterial bioactives?

The Atlantic Rainforest does not have a uniform physiognomy, its relief determines different environmental conditions that define the composition of its flora and fauna. Within this ecosystem, bromeliads that form tanks with their leaves hold water reservoirs throughout the year, maintaining complex food chains, based mainly on autotrophic and heterotrophic bacteria. Some works concluded that the water held by tank bromeliads concentrate the microbial diversity of their ecosystem. To investigate the bacterial diversity and the potential biotechnology of these ecosystems, tank bromeliads of the Neoregelia cruenta species from the Atlantic Rainforest in Brazil were used as models for this research. Bacteria isolated from these models were tested for production of bioactive compounds. DGGE of the water held by tank bromeliads was performed in different seasons, locations and sun exposure to verify whether these environmental factors affect bacterial communities. The DGGE bands profile showed no grouping of bacterial community by the environmental factors tested. Most of the isolates demonstrated promising activities in the tests performed. Collectively, these results suggest that tank bromeliads of the N. cruenta species provide important habitats for a diverse microbial community, suggesting that each tank forms a distinct micro-habitat. These tanks can be considered excellent sources for the search for new enzymes and/or new bioactive composites of microbial origin.

Detecção de formas amastigotas em exame parasitológico de esfregaço obtido a partir de suabe conjuntival de cães com leishmaniose visceral / Detection of amastigote forms in a parasitological exam of smears made from conjuntival swab in dogs with visceral leishmaniasis

Leishmaniose é uma enfermidade multissistêmica cujas manifestações clínicas são extremamente variáveis. Em cães sinais clínicos oftálmicos são relativamente frequentes, ainda que outros sinais sistêmicos não sejam identificados. Atualmente, o diagnóstico da doença baseia-se em métodos parasitológicos, sorológicos e moleculares, mas, até o momento, a identificação de formas amastigotas desse parasito em esfregaços feitos a partir de suabes conjuntivais não é empregada rotineiramente. Valendo-se de cães sorologicamente positivos para leishmaniose, portadores (G1) ou não (G2) de alterações oftálmicas, este estudo avaliou a viabilidade do esfregaço a partir de suabe conjuntival como método de diagnóstico para a enfermidade. O exame suprarreferido foi positivo em 60% dos animais do G1 e 38,1% do G2, no entanto não houve diferença estatisticamente significativa em relação à positividade nos dois grupos (P=0,2167). Os dados apontam para uma tendência de os cães com leishmaniose e com sinais oftálmicos serem positivos ao exame parasitológico de esfregaço a partir de suabe conjuntival, podendo esse método ser útil no diagnóstico parasitológico da leishmaniose canina.

Leishmaniasisis is a multisystemic disease with varying clinical presentations. In dogs, alterations in the eyes are commonly observed even in animals with no systemic signs. The diagnosis of leishmaniasis is currently based on parasitological, serological and molecular methods, although the identification of amastigote forms of this parasite in conjunctival swabs is not a routine technique in clinical practice. Serologically positive dogs for leishmaniasis presenting (G1) or not (G2) ocular alterations were enrolled in this study to evaluate the conjunctival swab as a method for the diagnosis of this disease. The parasitological evaluation of the swabs disclosed 60% positivity for dogs in group 1, whereas only 38.1% of dogs in group 2 were positive. However, no significant difference was documented between the two groups (P=0.2167). Our data suggest a tendency for dogs with ocular signs to be tested positive in the conjunctival swab exam, thus, this method is useful in the diagnosis of canine leishmaniasis.

Comparison of different protocols for the extraction of microbial DNA from reef corals

This study aimed to test different protocols for the extraction of microbial DNA from the coral Mussismilia harttii. Four different commercial kits were tested, three of them based on methods for DNA extraction from soil (FastDNA SPIN Kit for soil, MP Bio, PowerSoil DNA Isolation Kit, MoBio, and ZR Soil Microbe DNA Kit, Zymo Research) and one kit for DNA extraction from plants (UltraClean Plant DNA Isolation Kit, MoBio). Five polyps of the same colony of M. harttii were macerated and aliquots were submitted to DNA extraction by the different kits. After extraction, the DNA was quantified and PCR-DGGE was used to study the molecular fingerprint of Bacteria and Eukarya. Among the four kits tested, the ZR Soil Microbe DNA Kit was the most efficient with respect to the amount of DNA extracted, yielding about three times more DNA than the other kits. Also, we observed a higher number and intensities of DGGE bands for both Bacteria and Eukarya with the same kit. Considering these results, we suggested that the ZR Soil Microbe DNA Kit is the best adapted for the study of the microbial communities of corals.

Comparison of different protocols for the extraction of microbial DNA from reef corals

This study aimed to test different protocols for the extraction of microbial DNA from the coral Mussismilia harttii. Four different commercial kits were tested, three of them based on methods for DNA extraction from soil (FastDNA SPIN Kit for soil, MP Bio, PowerSoil DNA Isolation Kit, MoBio, and ZR Soil Microbe DNA Kit, Zymo Research) and one kit for DNA extraction from plants (UltraClean Plant DNA Isolation Kit, MoBio). Five polyps of the same colony of M. harttii were macerated and aliquots were submitted to DNA extraction by the different kits. After extraction, the DNA was quantified and PCR-DGGE was used to study the molecular fingerprint of Bacteria and Eukarya. Among the four kits tested, the ZR Soil Microbe DNA Kit was the most efficient with respect to the amount of DNA extracted, yielding about three times more DNA than the other kits. Also, we observed a higher number and intensities of DGGE bands for both Bacteria and Eukarya with the same kit. Considering these results, we suggested that the ZR Soil Microbe DNA Kit is the best adapted for the study of the microbial communities of corals.

Does usnic acid affect microtubules in human cancer cells? / O ácido úsnico pode afetar microtúbulos em células cancerosas humanas?

Usnic acid, a lichen metabolite, is known to exert antimitotic and antiproliferative activities against normal and malignant human cells. Many chemotherapy agents exert their activities by blocking cell cycle progression, inducing cell death through apoptosis. Microtubules, protein structure involved in the segregation of chromosomes during mitosis, serve as chemotherapeutical targets due to their key role in cellular division as well as apoptosis. The aim of this work was to investigate whether usnic acid affects the formation and/or stabilisation of microtubules by visualising microtubules and determining mitotic indices after treatment. The breast cancer cell line MCF7 and the lung cancer cell line H1299 were treated with usnic acid 29 µM for 24 hours and two positive controls: vincristine (which prevents the formation of microtubules) or taxol (which stabilizes microtubules). Treatment of MCF7 and H1299 cells with usnic acid did not result in any morphological changes in microtubules or increase in the mitotic index. These results suggest that the antineoplastic activity of usnic acid is not related to alterations in the formation and/or stabilisation of microtubules.

O ácido úsnico, um metabólito de liquens, é conhecido por sua atividade antimitótica e antiproliferativa em células humanas normais e malignas. Muitos quimioterápicos exercem suas atividades bloqueando a progressão do ciclo celular e induzindo morte celular por apoptose. Os microtúbulos, estruturas protéicas envolvidas na segregação dos cromossomos durante a mitose, servem como alvo quimioterapêutico devido ao seu importante papel tanto na divisão celular quanto nos mecanismos de morte celular por apoptose. O objetivo deste trabalho foi investigar se o ácido úsnico afeta a formação e/ou estabilização dos microtúbulos, a partir da visualização de microtúbulos e determinação de índices mitóticos após o tratamento. Células de câncer de mama MCF7 e de câncer de pulmão H1299 foram tratadas por 24 horas com 29 µM de ácido úsnico e dois controles positivos: vincristina (que impede a formação de microtúbulos) e taxol (que estabiliza microtúbulos). O tratamento das células MCF7 e H1299 com o ácido úsnico não resultou em aumento do índice mitótico. Os resultados sugerem que a atividade antineoplásica do ácido úsnico não está relacionada a alterações na formação e/ou estabilização de microtúbulos.

Análise faunística e flutuação populacional de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) em pomares comerciais de goiaba na região do Cariri cearense / Faunistic and populational analysis of fruit flies (Diptera: Tephritidae) in commercial guava orchards in the Cariri region (State of Ceará), Brazil

Devido à importância das moscas-das-frutas como pragas da fruticultura, este trabalho teve como objetivos caracterizar as populações das moscas-das-frutas em pomares comerciais de goiaba na região do Cariri, Estado do Ceará, por meio de índices faunísticos e estudar a flutuação populacional dessas moscas ao longo do ano. Para isso, foram instaladas armadilhas McPhail nos Municípios de Barbalha, Crato e Juazeiro do Norte. As armadilhas foram examinadas semanalmente e as moscas capturadas foram triadas, conservadas em álcool a 70% e identificadas. Constatou-se que Anastrepha zenildae (Wiedemann), A. sororcula Zucchi, A. fraterculus (Wiedemann), A. obliqua (Macquart) e Ceratitis capitata (Wiedemann) foram as moscas-das-frutas associadas à goiaba. Dessas, A. zenildae. A. sororcula e A. obliqua foram dominantes e constantes na região estudada, enquanto que A. fraterculus e C. capitata foram não-dominantes, mas também constantes. A. zenildae ocorreu em quase todos os meses do ano, exceto em outubro e dezembro de 2008, nos três pomares de goiaba do Cariri e com picos populacionais nos meses mais chuvosos e com temperaturas amenas.

Due to the importance of fruit-flies as pests in fruit growing, the present study was aimed to characterize the populations of fruit-flies in commercial guava orchards in the Cariri region (state of Ceará), Brazil, by means of faunistic indexes and to study their population fluctuation during the year. For this purpose, McPhail traps were installed in the counties Barbalha, Crato and Juazeiro do Norte. The traps were examined weekly and the captured flies were separated, preserved in 70% alcohol and identified. Anastrepha zenildae (Wiedemann), A. sororcula Zucchi, A. fraterculus (Wiedemann), A. obliqua (Macquart) and Ceratitis capitata (Wiedemann) were associated with guava fruits. Of them, A. zenildae. A. sororcula and A. obliqua were dominant and constant in the studied region, while A. fraterculus and C. capitata were non-dominant but constant. A. zenildae occurred in almost all months of the year, except October and December of 2008, with population peaks in the rainy season with its milder temperatures.

Possíveis interações medicamentosas com psicotrópicos encontradas em pacientes da Zona Leste de São Paulo / Possible drug interactions with psychotropics found in patients in East São Paulo

Interação medicamentosa é o resultado de uma interferência no efeito de um medicamento por outros agentes. Dentre os fatores que resultam nas interações medicamentosas destacam-se a automedicação e a prática da polifarmácia. O objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento de interações medicamentosas que ocorrem com fármacos que atuam no sistema nervoso central, suas possíveis consequências, bem como os motivos que propiciam tal situação. Foi realizado um estudo observacional transversal de 60 indivíduos da zona leste de São Paulo que utilizam medicamentos psicotrópicos, maiores de 21 anos e de ambos os sexos, por meio de um questionário entre junho e agosto de 2008. Os principais psicotrópicos utilizados pelos indivíduos foram benzodiazepínicos e antidepressivos (54 indivíduos), sendo que estes fármacos apresentam alto índice de interações medicamentosas. Cerca de 77% utilizam outros medicamentos em paralelo ao tratamento com psicotrópicos, sendo que destes apenas 35% o fazem com supervisão médica e 27% dos indivíduos utilizaram bebidas alcoólicas concomitantemente. As principais interações encontradas envolveram antidepressivos com benzodiazepínicos, antiulcerogênicos, anticonvulsivantes e álcool. Conclui-se que a automedicação e o uso inadequado de medicamentos são fatores que podem propiciar a ocorrência das interações medicamentosas encontradas, algumas com consequências graves.

A drug interaction is the interference in the effect of a drug by another substance. Outstanding among the factors that result in drug interactions are selfmedication and the practice of polypharmacy. The aim of this work was to conduct a survey of drug interactions that occur with drugs that act on the central nervous system, their possible consequences and the reasons for their occurrence. An observational cross-sectional study was performed on 60 subjects from East Sao Paulo who take psychotropic drugs (over 21 years old and of both genders), by means of a questionnaire applied from June to August 2008. The main drugs taken by those interviewed were benzodiazepines and antidepressants (54 subjects), which are drugs that have high rates of drug interactions. About 77% took other drugs, in parallel with the psychotropic drug treatment, of which only 35% were under medical supervision, and 27% of subjects drank alcohol while taking psychotropic drugs. The main interactions found involved antidepressants with benzodiazepines, antiulcerogenics, anticonvulsants and alcohol. We concluded that self-medication and inadequate drug usage are factors that favor the occurrence of the drug interactions found, some of them with dangerous consequences.

Peak torque and knee kinematics during gait after eccentric isokinetic training of quadriceps in healthy subjects / O pico de torque e a cinemática do joelho durante a marcha após treino isocinético excêntrico do quadríceps em sujeitos saudáveis

OBJECTIVE: To evaluate the effects of eccentric isokinetic training on knee range of motion (ROM) of healthy subjects. METHODS: The knee extensor and flexor isokinetic peak torques and ROM of flexion/extension and varus/valgus knee movements during gait of 18 healthy men (21.7±2.2 years; 1.73±0.10m; 68.7±9.4kg; body mass index: 22.6±2kg/m²) were analyzed, before and after six weeks of bilateral eccentric isokinetic training of the knee extensors at 30º/s. RESULTS: The knee extensor torque increased in both limbs (right, from 229±54 to 304±53Nm; p<0.01; and left, from 228±59 to 311±63Nm; p<0.01), without any difference in torque gain between them. The knee flexor peak torque increased (from 114±30 to 123±22Nm; p<0.05), but the hamstrings/quadriceps (H/Q) ratio decreased (from 0.5±0.08 to 0.39±0.07; p<0.01) after the training. There were no differences in the flexion/extension and varus/valgus movements after the training, except for a small change (4°) in valgus for the left knee. CONCLUSIONS: The eccentric isokinetic training of the knee extensors increased the extensor torque and decreased the H/Q ratio, although the effect on the gait pattern seemed negligible in healthy subjects. Associated training for flexors, complementary to the extensor training, seems to be necessary for balance between knee agonists and antagonists.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do treino isocinético excêntrico sobre a amplitude de movimento (ADM) do joelho em sujeitos saudáveis. MÉTODOS: Foram analisados os picos de torque isocinético dos extensores e flexores do joelho e a ADM de flexo/extensão e valgo/varo, durante a marcha, de 18 homens saudáveis (21,7±2,2 anos; 1,73±0,10m; 68,7±9,4kg; índice de massa corpórea: 22,6±2kg/m²) antes e após seis semanas de treino isocinético excêntrico bilateral dos extensores do joelho a 30º/s. RESULTADOS: O torque extensor do joelho aumentou em ambos os membros, direito (de 229±54 para 304±53Nm; p<0,01) e esquerdo (de 228±59 para 311±63Nm; p<0,01) sem diferença de ganho de torque entre eles. O pico de torque flexor aumentou (de 114±30 para 123±22Nm; p<0,05), mas a razão isquiotibiais/quadríceps (I/Q) diminuiu (de 0,5±0,08 para 0,39±0,07; p<0,01) após o treino. Não houve diferença para os movimentos de flexo/extensão e valgo/varo após o treino, exceto uma pequena mudança (4°) no valgo para o joelho esquerdo. CONCLUSÕES: O treino isocinético excêntrico dos extensores do joelho aumentou o torque extensor e diminuiu a razão I/Q, entretanto o efeito sobre o padrão da marcha parece desprezível em sujeitos saudáveis. Um treino associado dos flexores, complementar ao treino dos extensores parece ser necessário para o equilíbrio entre agonistas e antagonistas do joelho.

Swimming performance of the freshwater neotropical fish: Pimelodus maculatus Lacepède, 1803 / Capacidade natatória da espécie neotropical de água doce: Pimelodus maculatus Lacepède, 1803

The present study used fixed and increasing velocity tests in an experimental apparatus based on Brett's respirometer to examine prolonged and sustained speeds of the "mandi-amarelo", Pimelodus maculatus. When comparing the curves of critical speed versus total length between the mandi and the sockeye salmon Oncorhynchus nerka, it is observed that for an equal total length, the mandi presents a greater speed, probably due to water temperature differences. The sustained speed for the species was estimated in 5 lengths per second and the percentage of fatigued fish within time in a certain velocity was established. The data raised for the mandi represents an important contribution to the improvement of the handling of the species, providing guidance and criteria for designing several structures, such as fishways, fish screens and guidance systems.

No presente estudo, foram utilizados testes de velocidade fixa e progressiva em um aparato experimental baseado no respirômetro de Brett, para examinar as velocidades prolongada e sustentável do mandi-amarelo, Pimelodus maculatus. Quando comparadas as curvas de velocidade crítica versus o comprimento do corpo entre o mandi e o salmão Oncorhynchus nerka, é observado que, para um mesmo comprimento, o mandi apresenta velocidades superiores, provavelmente devido a diferenças na temperatura da água. Foram estimadas a velocidade sustentável da espécie em cinco comprimentos por segundo e a porcentagem de peixes fatigados ao longo do tempo em uma dada velocidade estimada. Os dados obtidos para o mandi representam uma importante contribuição para o manejo da espécie, provendo critérios de projeto para a construção de estruturas como mecanismos de transposição e sistemas de proteção e orientação.